SISTEMAS DE EDICION GENÉTICA EN CERDOS QUE SIRVEN DE MODELOS DE ENFERMEDAD

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La edición génica porcina es una tecnología con gran interés y aplicación en el campo biomédico (revisado recientemente por (Navarro-Serna et al. 2022b). El desarrollo tecnológico observado en los últimos años en el uso de Crispr-cas deberá satisfacer una demanda creciente de modelos porcinos de enfermedad humana y xenotransplantes de aplicación inmediata en la medicina traslacional y de nuevas variedades genéticas de cerdos que favorezcan la resistencia a enfermedades víricas que tendrán un impacto directo e indirecto en la salud humana.

Métodos:

El grupo de Fisiología de la Reproducción de la Universidad de Murcia (www.um.es/fisiorep) ha desarrollado estudios en este campo participando en la generación de cerdos modificados como modelos de enfermedad humana utilizando técnicas de CRISPR/cas, produciendo animales vivos TPC2KO, y embriones porcinos editados de diversos modelos (TPC1, TPC2, CALP3, CD163, etc) (Gadea et al. 2018; Navarro-Serna et al. 2019; Navarro-Serna et al. 2021; Navarro-Serna et al. 2022a; Piñeiro-Silva et al. 2022). Se han establecido protocolos eficientes para generar embriones editados KO tanto por medio de microinyección, como de electroporación y lipofección de ovocitos porcinos antes del proceso de fecundación in vitro. Y se ha optimizado un sistema de transferencia quirúrgica de embriones para obtener animales editados genéticamente. Se cuenta con un amplio equipo de investigadores, colaboradores y asesores externos con una dilatada experiencia investigadora, con un carácter multidisciplinar e internacional que puede dar solvencia técnica.

Resultados:

Se dispone de un sistema eficiente para producir modelos porcinos editados genéticamente que sirvan como modelo de enfermedad, estos modelos pueden ser modelos simples o monogéncos con tasas de mutación en el rango entre el 40 y el 90%, y modelos más complejos para editar simultáneamente de dos a cinco genes con unas tasas de mutación variable según los casos. En esta etapa previa, hemos desarrollado protocolos de evaluación del fenotipo de los animales TPC2KO generados, detectando aspectos que tienen un posible impacto en su aplicación en medicina humana como son la funcionalidad y capacitación espermática (Kamli et al. 2022) y el incremento en la prevalencia de hipoacusia (datos no publicados).

Conclusiones:

Se dispone de una potene herramienta para generar modelos animales, que permitan avanzar en el estudio de las enfermedades humanas, en los factores que influyen en la evolución de esta, así como permiten explorar nuevas terapias. Referencias Gadea et al. (2018). Reprod Domest Anim 53:87-88 Kamli et al. (2022) The role of two-pore channel 2 (TPC2) in sperm motility and energy utilisation in mice and pigs. Society for Reproduction and Fertility, Liverpool. UK., 5-8 January 2022 Navarro-Serna et al (2021) CRISPR J 4 (1):132-146. doi:10.1089/crispr.2020.0078 Navarro-Serna et al. (2022a) Int J Mol Sci 23 (4):2135. doi:10.3390/ijms23042135 Navarro-Serna et al. (2022b) Generation of Gene Edited Pigs. Springer International Publishing, Cham, pp 71-130. doi:10.1007/978-3-031-07496-7_3 Piñeiro-Silva et al. (2022) Production of genetically modified porcine embryos by lipofection of in vitro matured oocytes using CRISPR/CAS9 system. International Congress on Animal Reproduction (ICAR). , Bologna. Italy., 26-30 June 2022


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