Numerosos estudios ponen de relevancia el papel del metabolismo de la glucosa en el desarrollo de diversas enfermedades, entre ellas aquellas que cursan con inflamación crónica como es el caso de la psoriasis. La psoriasis se caracteriza por la hiperproliferación de queratinocitos y la infiltración de células inmunitarias en la piel. Concretamente, el lactato puede desemplear un papel importante en esta enfermedad debido a su carácter inmunomodulador y a su relación con la proliferación celular. Teniendo esto en cuenta, en este trabajo se emplea el pez cebra como modelo de psoriasis (línea spint1a -/-) para comprobar cómo la modulación del metabolismo de la glucosa influye en el desarrollo de la inflamación crónica en la piel característica de este modelo.

Se han realizado ensayos con compuestos e inhibidores farmacológicos de enzimas glucolíticas en el modelo spint1a -/-. Para comprobar los efectos de los tratamientos sobre el fenotipo de inflamación crónica de estas larvas se realizó la observación de los embriones a los 3 días post fecundación para analizar tanto el número de agregados de queratinocitos como la infiltración de neutrófilos en la piel de cada larva. Además se ha determinado la cantidad de NAD y NADH en la piel de las larvas control y tratadas mediante ensayos de luciferasa. Con el propósito de profundizar en el mecanismo de acción de los compuestos se realizó un microarray con la piel de las larvas control y tratadas. La validación de los genes seleccionados se llevó a cabo mediante RT-qPCRs. En la actualidad se está realizando la sobreexpresión o la inhibición genética de los genes seleccionados en las larvas de pez cebra mediante la microinyección de mRNAs o de guías de RNA empleando el sistema CRISPR-Cas9.

Encontramos que la inhibición farmacológica de la enzima lactato deshidrogenasa (LDH) con oxamato mejoró la inflamación crónica de las larvas spint1a -/- de manera dosis dependiente. Sorprendentemente, la adición de lactato produjo también una mejora del fenotipo inflamatorio. Puesto que la LDH cataliza una reacción reversible en la que se consume NADH para generar lactato o NAD para producir piruvato, se hipotetizó que la adición de lactato modificaba los niveles de NADH/NAD, de esta forma mejorando también la inflamación. De hecho en spint1a -/- ya se ha descrito que niveles altos de NAD/NADH incrementan aún más la inflamación. Los ensayos de rescate con NAD y lactato mostraron que el lactato es capaz de mejorar la inflamación producida por el NAD en larvas spint1a-/-. Además, la medición de NAD y NADH en las larvas tratadas con lactato confirmó que se produce un aumento significativo de la relación NADH/NAD. Por último, el análisis de microarray realizado reveló varios genes candidatos para profundizar en el estudio del mecanismo por el que estos inhibidores mejoran la inflamación de las larvas. Se están llevando a cabo ensayos funcionales sobreexpresando e inhibiendo dichos genes para determinar su implicación en la mejora de la infamación que producen los tratamientos.

Tanto la inhibición de la enzima lactato deshidrogenasa con oxamato como el tratamiento de las larvas con lactato mejoran el estado de inflamación crónica en el modelo de psoriasis de pez cebra spint1a -/-. Los tratamientos con lactato y oxamato aumentan la relación NADH/NAD. Se necesitan realizar más estudios para conocer la implicación de los genes identificados en el microarray como diferencialmente expresados con ambos tratamientos.