La leucemia infantil es la neoplasia maligna más común en niños y consiste fundamentalmente en leucemia linfoblástica aguda y leucemia mieloide aguda (LMA). Ésta última (LMA) es una neoplasia maligna de las células madre precursoras de linaje mieloide que a día de hoy sigue siendo una enfermedad letal. Por tanto, es necesario generar modelos animales que permitan identificar nuevas dianas terapéuticas y tratamientos que permitan una medicina personalizada.

Nuestro laboratorio ha generado un total de tres modelos de LMA en pez cebra. El primero, Tg(mpx:GAL4;uas:eGFP-HRAS_G12V), consiste en un modelo de pez cebra que expresa la proteína verde fluorescente (eGFP) fusionada al oncogén humano HRAS_G12V, bajo el control del promotor de la mieloperoxidasa de neutrófilos (mpx). En el segundo, Tg(lyz:mVENUS-NRAS_Q61L), expresa la fusión entre la proteína fluorescente VENUS y el oncogén NRAS bajo el control del promotor de la lisozima de neutrófilos (lyz). Y en el tercero, Tg(lyz:MYC-eGFP), el promotor de la lisozima de neutrófilos controla la expresión de la fusión entre el oncogén MYC humano y la eGFP. El desarrollo de LMA en estos tres modelos se ha determinado mediante la cuantificación del número de neutrófilos fluorescentes en la cola de larvas de pez cebra, desde su eclosión a 2/3 días post-fecundación (dpf) hasta 7-8 dpf, mediante microscopia de fluorescencia, usando como control negativo, larvas que expresen proteínas fluorescente en neutrófilos, tales como Tg(mpx:eGFP) y Tg(lyz:dsRED).

La cuantificación del número de células fluorescentes en la cola de larvas de los tres modelos in vivo de LMA generados ha puesto de manifiesto un aumento significativo del número de células fluorescentes a lo largo del desarrollo. Además, las larvas que expresa los oncogenes RAS, pero no las que expresan MYC, experimentaron una dispersión de los neutrófilos. Los estudios de imagen también revelan la existencia de diferentes poblaciones de neutrófilos con diferente nivel de expresión de los oncogenes. Estos resultados han sido confirmados mediante secuenciación de RNA de célula única que, además, revelan un perfil de expresión génica diferencial en las diferentes poblaciones de neutrófilos. Finalmente, estudios funcionales mediante inhibición farmacológica y genética de genes diferencialmente expresados demuestran la utilidad de los modelos desarrollados para la identificación de nuevas dianas terapéuticas en LMA.

Se han generado tres modelos de LMA en pez cebra que permiten un análisis rápido de la evolución de la LMA, la identificación de genes y rutas de señalización que afectan esta enfermedad, y el escrutinio a gran escala de fármacos para su tratamiento.