El inflamasoma es un conjunto de estructuras moleculares que es responsable de distintos procesos inflamatorios. Se activa principalmente en macrófagos y monocitos que entran en contacto con patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPs) y señales de peligro no asociadas a patógenos (DAMPs). NLRP3 es uno de los inflamosomas más estudiados, y su activación conlleva el ensamblaje de un complejo multiproteico formado por NLRP3, ASC y pro-caspasa 1, que culmina en el procesamiento y liberación de las citoquinas IL-1beta e IL-18, evocando un ambiente proinflamatorio. Después de la activación del inflamasoma, el ASC se acumula en un gran complejo proteico denominado "speck". Por lo tanto, el desarrollo del speck de ASC puede utilizarse como un simple indicador de la activación del inflamasoma. En el trasplante de hígado ortotópico existen factores esenciales que afectan directamente al éxito del mismo. Uno de ellos es el tipo de muerte que ha sufrido el donante clasificándose como donante por muerte cerebral (DMCE) o por muerte en asistolia o muerte cardiaca (DMCA). Además, el tiempo de isquemia fría que el órgano sufre hasta que es trasplantado e irrigado de nuevo también parece un factor clave para el éxito del trasplante. Nuestro objetivo es comprobar si la localización de “specks” mediante técnicas de inmunofluorescencia sobre biopsias hepáticas, nos indica si existe una relación directa entre el tipo de donación y el tiempo de isquemia fría con la activación del inflamosoma in situ.

Se estudió mediante inmunofluorescencia los specks de ASC en cortes histológicos de muestras del hígado procedente del donante a distintos tiempos (T1; muestra recogida antes de la extracción del órgano, T2; tras la isquemia fría, antes de la implantación, T3; 1 hora tras la reperfusión del órgano ya trasplantado). Para ello hemos usado dos clones de anticuerpos que reconocen ASC (clon HASC-71 y clon N-15R)

El anticuerpo proveniente del clon N-15R marca tanto specks como ASC citosólico mientras que el anticuerpo del clon HASC-71 solo marca specks d ASC, dejando imágenes mucho más nítidas donde podemos diferenciar además el tipo celular.

El clon HASC-71 se adecua perfectamente al estudio y los resultados preliminares son esperanzadores.